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低共熔溶剂提取山里红多糖工艺优化研究
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颜若铭,王子轩,曾怡
摘要:目的优化超声辅助低共熔溶剂提取山里红总多糖工艺并考察其抗氧化活性。方法以多糖含量为指标,低共熔溶剂种类、摩尔比、料液比、含水量和超声时间为影响因素,采用超声单因素分析和响应面方法优化低共熔溶剂提取山里红总多糖的工艺参数,并以DPPH自由基和·OH自由基清除能力对其抗氧化活性进行评价。结果山里红总多糖成分的最佳提取工艺:以氯化胆碱-丙二醇为低共熔溶剂,摩尔比为1:3,料液比为1:20,含水量为20.12%,超声时间为38.98min。在此工艺下,山里红总多糖含量可达到(523.49±8.79)mg/g。在抗氧化实验中,山里红多糖对DPPH自由基清除作用的IC50为1.33,对·OH自由基清除的IC50为1.23。结论超声辅助低共熔溶剂优化的多糖提取工艺提取率高且工艺稳定,山里红多糖具有较好的抗氧化作用。
基于BMSCs淫羊藿-仙茅-巴戟天角药抗骨质疏松药效物质提取工艺研究
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郭辰,王晓迪
摘要:目的筛选淫羊藿-仙茅-巴戟天角药抗骨质疏松药效物质的最佳提取工艺。方法采用正交设计,选取提取时间、料液比、乙醇浓度为考察因素,以BMSCs细胞增殖率结合淫羊藿苷、总黄酮含量为考察指标,筛选淫羊藿-仙茅-巴戟天角药抗骨质疏松药效物质的最佳提取工艺,并对最佳提取条件进行验证。结果兼顾生产效率和节约能源,优选出淫羊藿-仙茅-巴戟天角药药效物质的最佳提取条件为提取时间1.5h,乙醇浓度55%,溶剂用量10倍。验证实验结果BMSCs细胞增殖率、淫羊藿苷及总黄酮含量与工艺考察结果非常接近。结论该方法在保证淫羊藿-仙茅-巴戟天角药治疗骨质疏松的药效基础上,结合淫羊藿苷及总黄酮含量进行综合评价,优化提取工艺,使得实验结果更科学合理。
黄芪赤风汤指纹图谱建立及主要成分含量测定
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刘承,袁晚月,王旭民
摘要:目的建立10批黄芪赤风汤供试品溶液的指纹图谱,以及对方中芍药内酯苷、芍药苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素、黄芪甲苷7种主要成分进行测定。方法采用DiamonsilC18(2)色谱柱(4.6mm×250mm,5μm);使用0.05%甲酸水(B)-5%四氢呋喃95%乙腈(D)为流动相进行梯度洗脱;流量:1mL/min;柱温:23℃,进样量:10μL。基于HPLC-ELSD法,漂移管温度:60℃,柱温:30℃,进样量:20μL。结果10批黄芪赤风汤供试品共标出16个共有峰,其相似度均在0.9以上,并对毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花素、芍药苷、升麻素、5-O-甲基维斯阿米醇苷、毛蕊异黄酮、芍药内酯苷分别进行指认;基于HPLC-ELSD法:10批黄芪赤风汤其相似度均在0.903以上。且7种主要成分在各自的加样范围中线性关系良好,各自加样回收率RSD≤3%,含量为:芍药内酯苷(9.58±1.70)mg/g、芍药苷(8.36±0.78)mg/g、毛蕊异黄酮葡萄糖苷(0.77±0.11)mg/g、芒柄花苷(0.16±0.06)mg/g、毛蕊异黄酮(0.50±0.06)mg/g、芒柄花素(0.25±0.05)mg/g、黄芪甲苷(0.30±0.10)mg/g。结论本研究建立的黄芪赤风汤指纹图谱分析方法可信度高、稳定,可用于黄芪赤风汤的质量控制及含量测定。
宣白承气汤对痰热腑实型哮喘大鼠肺组织病理损伤及Th1/Th2失衡影响
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张清清,郭柯伟
摘要:目的观察宣白承气汤对痰热腑实型哮喘大鼠肺组织病理损伤情况及血清中Th1/Th2失衡的影响。方法将50只Wistar雄性大鼠随机分为空白组、模型组、定喘汤组、宣白承气汤组、地塞米松组,每组10只。利用卵清蛋白(OVA)诱导哮喘模型,并施加痰热腑实因素,造模成功后,实验组按体质量1.5mL/100g分别给予定喘汤、宣白承气汤和地塞米松溶液,空白对照组与模型组按等比例给予0.9%氯化钠溶液,1次/d,连续用药14d后,观察各组大鼠一般情况;记录各组大鼠体质量、肛温及代谢情况;HE染色观察大鼠肺组织病理改变情况,酶联免疫吸附测定法(ELISA)比较大鼠血清中Th1细胞因子白细胞介素(IL)-4和Th2细胞因子干扰素-γ(IFN-γ)的含量。结果空白组大鼠一般状态良好,毛发柔顺光泽,呼吸节律均匀平稳,四肢温和,体质量呈稳定增长趋势,肛温无异常增高,日均进食进水量平稳,大便量多质润;模型组大鼠精神状态差,毛发粗糙凌乱,呼吸节奏加快,可闻及哮鸣音,且抓挠口鼻频率增高,周围可见淡黄色黏性分泌物,体质量增长趋势较空白组减缓,且整体体质量偏低,肛温较空白组显著升高(P<0.01),日均进食进水量显著下降(P<0.01),24h排便量明显减少(P<0.01)且质地坚硬;定喘汤组大鼠精神状态良好,毛发较模型组平整,口鼻处少见黏性分泌物,偶见喘息气急、搔鼻、打喷嚏,呼吸节律随给药时间延长趋于平稳,体质量增长与模型组相近,给药后肛温明显降低(P<0.05),日均进水量较模型组稍有升高(P>0.05),进食量稍有增多(P<0.05),24h排便量增多(P>0.05)且质地变软;宣白承气汤组大鼠服药后整体状态良好,毛发光泽平整,口鼻黏性分泌物减少,呼吸喘息急促等症状相应改善,大鼠哮鸣音减少,抓挠口鼻频率低,体质量增长趋势较模型组更缓,且整体体质量小于模型组(P<0.01),给药后大鼠肛温显著降低(P<0.01),日均进食量进水量均增多(P<0.01),大便质软量多(P<0.01);地塞米松组大鼠用药1周期间各项状态较为稳定,继续用药后虽喘息气促明显改善,口鼻分泌物减少,但大鼠性情逐渐暴躁,肌肉僵直,皮肤松垮,毛发杂乱枯燥,体质量较模型组显著减少(P<0.01),肛温明显降低(P<0.01),日均进水量稍有增多(P>0.05),给药1周后日均进食量显著减少(P<0.01),继续给药后日均进食量稍有减少(P>0.05),24h排便量增多(P>0.05),且质稀软。组织病理切片显示空白组大鼠未见炎性病理改变,模型组可见明显炎性浸润,治疗后定喘汤组、宣白承气汤组、地塞米松组大鼠肺组织病理情况均有所缓解;ELISA结果显示模型组大鼠血清Th1细胞因子IFN-γ水平较空白组显著下降(P<0.01),Th2细胞因子IL-4水平较空白组显著升高(P<0.01),经宣白承气汤给药后大鼠IFN-γ水平显著升高(P<0.01),IL-4水平显著降低(P<0.01)。结论宣白承气汤可以通过泄热通腑的方法治疗痰热腑实型哮喘,改善哮喘症状,缓解大鼠肺组织病理损伤,改变血清中IL-4和IFN-γ的含量,从而调节Th1/Th2失衡。
荔枝核总黄酮抑制NLRP3炎症小体减轻小鼠急性肝损伤的作用
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李星炜
摘要:目的探讨荔枝核总黄酮对急性肝损伤的保护作用,及抑制NOD样受体家族3(NOD-likereceptorfamily3,NLRP3)炎症小体活化相关的机制。方法将昆明小鼠随机分为空白组,模型组,联苯双酯组,MCC950组,荔枝核总黄酮高、低剂量组。除空白组外,其余以腹腔注射0.2%CCl4-花生油溶液诱发小鼠急性肝损伤,观察各组小鼠肝功能,肝脏组织形态,肝组织活性氧族(ROS)水平,并以Westernblot法检测肝组织中NLRP3炎症小体相关蛋白的表达变化。结果与空白组相比,模型组小鼠血清中丙氨酸氨基转氨酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆汁酸(TBA)含量,肝组织中ROS水平均显著升高(P<0.05),肝组织中硫氧还蛋白结合蛋白(TXNIP)、NLRP3、半胱氨酸蛋白酶-1前体(pro-caspase-1)、白细胞介素-1β前体(pro-IL-1β)、白细胞介素-1β(IL-1β)蛋白表达显著增加(P<0.05),肝脏组织损伤程度严重;与模型组相比,荔枝核总黄酮剂量组显著降低CCl4所致急性肝损伤的小鼠血清中ALT、AST、TBA水平(P<0.05),降低肝组织中ROS水平(P<0.05),并减轻肝组织结构损伤,降低HE染色的形态学评分(P<0.05)。荔枝核总黄酮高剂量与MCC950组均显著下调了NLRP3炎症小体相关蛋白TXNIP、NLRP3、pro-caspase-1、pro-IL-1β、IL-1β表达(P<0.05)。结论荔枝核总黄酮减轻了CCl4引发的小鼠急性肝损伤,其机制可能与抑制NLRP3炎症小体活化参与的炎症反应有关。
珍珠粉有效成分促进肛瘘大鼠术后创面愈合的作用机制研究
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李锦文,张珊珊
摘要:目的观察珍珠粉在肛瘘大鼠术后创面恢复的药物促进机制,探讨其影响机制。方法造模30只SD大鼠,使其形成肛瘘术后创面,将未造模成功的大鼠剔除,按随机数字表法随机分为珍珠粉组、碳酸钙组、对照组,每组8只。珍珠粉组每日点涂珍珠粉末于肛瘘大鼠创面,碳酸钙组每日应用碳酸钙外敷于肛瘘大鼠创面,对照组每日用生理盐水冲洗肛瘘大鼠创面,连续干预14d。各组于应用药物治疗后的第3天、第7天、第14天于肛瘘大鼠创面取材,比较3组之间的创面毛细血管含量、TGF-β及VEGF的表达水平。结果与对照组相比,珍珠粉组可以增加创面组织中VEGF和TGF-β的表达(P<0.05),以上差异具有统计学意义。结论珍珠粉可以显著促进肛瘘大鼠术后创面的愈合,其提高VEGF和TGF-β的含量和活性,促进新生肉芽组织的生成可能是其发挥促进创面愈合的作用途径之一。
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